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ELISA試劑盒檢測重組蛋白的
更新時(shí)間:2016-11-30   點(diǎn)擊次數(shù):754次

 ELISA試劑盒檢測重組蛋白的 

  ELISA試劑盒采用RT-PCR擴(kuò)增出大小409bp豬繁殖與呼吸綜合征病毒核衣殼蛋白基因(PRRSV N gene),將該基因克隆到表達(dá)載體pGEX-KG,構(gòu)建重組表達(dá)載體pGEX-KG-N,轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株BL21(DM3)誘導(dǎo)表達(dá),經(jīng)SDS-PAGE和Western blot分析表明,重組N蛋白獲得了表達(dá),融合蛋白相對(duì)分子質(zhì)量為41 000,并具有良好的免疫學(xué)活性。置4℃前提保留12個(gè)月,試劑盒不亂性無顯著改變。研制的ELISA試劑盒為PRRSV臨床血清抗體檢測及流行病學(xué)調(diào)查提供了技術(shù)手段。ELISA試劑盒對(duì)350份臨床疑似血清檢出率為88.6%。擴(kuò)大誘導(dǎo)培養(yǎng),收集菌體,提取包涵體,用GST-Protein Purtification Kit親和層析純化目的蛋白,SDS-PAGE電泳檢測純度達(dá)到90%以上,可知足診斷抗原質(zhì)量要求。ELISA試劑盒批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為3.44%~6.34%和5.04%~7.64%。優(yōu)化后抗原zui適包被質(zhì)量濃度為2.5mg/L;血清zui適稀釋度為1∶100;對(duì)血清樣本檢測臨界值為0.224;特異性為95%,敏感性為90%;與豬細(xì)小病毒、豬偽狂犬病病毒、豬乙型腦炎病毒、豬圓環(huán)病毒、豬瘟病毒等常見豬繁殖障礙病尺度陽性血清無交叉反應(yīng)。用純化PRRSV重組核衣殼蛋白GST-N為包被抗原,建立檢測PRRSV血清的間接ELISA診斷方法,并組裝ELISA試劑盒。

Anti-Bassoon/RCN     規(guī)格:    規(guī)格:     0.2ml    產(chǎn)品名稱:    鋅指蛋白231抗體
Anti-Bax      規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    Bax抗體
Anti-Bcl-2      規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    Bcl-2抗體
Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21      規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    乳腺癌耐藥相關(guān)蛋白抗體
Anti-BDNF       規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子/腦衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子
Anti-Beta-casein      規(guī)格:    規(guī)格:     0.2ml    產(chǎn)品名稱:    β-酪蛋白兔抗山羊、綿羊
anti-bov β-lactoglobulin      規(guī)格:    規(guī)格:     1.0ml    產(chǎn)品名稱:    牛β-乳球蛋白抗體
anti-bov Casein      規(guī)格:    規(guī)格:     1.0ml    產(chǎn)品名稱:    抗牛酪蛋白抗體
Anti-BFGF/FGF-2      規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    堿性成纖維細(xì)胞生長因子抗體
Anti-BGP      規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    骨保護(hù)蛋白/骨鈣素抗體
Anti-Bid       規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體
Anti-BIRC5/Survivin variant      規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    細(xì)胞凋亡抑制因子5抗體
Anti-BK channel       規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    BK通道蛋白抗體
Anti-BKCa channels      規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    鈣激活鉀通道蛋白抗體
Anti-BMP2       規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2抗體
Anti-BMP-7      規(guī)格:    規(guī)格:     0.2ml    產(chǎn)品名稱:    骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7抗體

 

 

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